The Isolation and Identification of Alkaloids from Spongia obligue

Xu Shihai，^#Zeng Longmei，^#Su Jingyu
（Department of chemistry, Jinan University, Guangzhou 510632
^#Department of Chemistry, Zhongshan University, Guanzhou 510275)

Abstract A series of alkaloids have been isolated from the sponge collected from the Xisha islands in the South China Sea. A new alkaloid obliguen 1 and one pyrroloactam alkaloid 2 were determined with the dates of IR, MS, HNMR,and CNMR.
Key words   sponge, alkaloid, isolation and purification
摘要 从中国南海西沙群岛采集海绵Spongia obligue 中分离得到系列生物碱，本文报道一个新的吡咯生物碱obliguen 1和一个吡咯并内酰胺生物碱2，用IR，MS，HNMR，CNMR等波谱数据确定了它们的结构。
关键词 海绵 生物碱 分离与提纯

海绵Spongia obligue中生物碱的分离和结构鉴定

徐石海 ^#曾陇梅 ^#苏镜娱
（暨南大学化学系 510632 ^#中山大学化学系 510275）

   海绵中的生物碱种类繁多，结构独特，并且几乎都具有不同的生物活性^[1，2]，在寻找海洋药物过程中，这类化合物正在越来越受到人们的重视。我们从中国南海Spongia obligue 中分离得到系列生物碱，本文报道一个新的含溴吡咯生物碱obliguen 1和一个吡咯并内酰胺生物碱2 ，这两种生物碱首次从此种海绵中分离得到。

1 实验部分
1.1 仪器与试剂
    美国NICOLEF公司产5DX-FT红外光谱仪；JEOL公司产FX-90Q核磁共振仪，BRUKER-600型核磁共振仪；国产显微熔点仪，温度计未校正，PERKIN ELMER 240C自动元素分析仪。
1. 2 化学成分分离
    将切碎的海绵Spongia obligue（干重1.5公斤）用95%乙醇在室温下浸提3次，浸提物减压浓缩，乙酸乙酯-水配分5次，合并乙酸乙酯相，回收溶剂得粗提物40g。粗体物进行硅胶柱层析，以石油醚(60-90，分析纯)-乙酸乙酯为洗脱剂进行梯度洗脱，从25%乙酸乙酯-石油醚洗脱得一黄色固体1，再经3次柱层析，甲醇重结晶得针状晶体13mg；从100%乙酸乙酯洗脱得黄色固体2，甲醇重结晶得黄色针状晶体15mg。
2 结果和讨论
2.1 1的化学结构
    用25%乙酸乙酯-石油醚冲洗硅胶柱，洗出一淡黄色固体，三次柱层析，甲醇四次重结晶，得黄色针状晶体1，熔点为124～126℃，1是新化合物，命名为obliguen。
    1的铜丝燃烧实验发出较强绿色火焰，证明含有卤族元素。EIMS谱指出分子离子峰269，存在同位素离子峰M/Z 267、269、271，强度比为1：2：1，说明该化合物含有两个溴原子。元素分析结果C：22.47%, H: 1.44%, N: 5.00%（理论值C：22.31%, H:1.12%, N:5.20%），说明1为一含氮化合物，至此，推断1的分子式为C₅H₃Br₂NO₂。
    IR光谱ν^KBr_max 3444，3198（cm^-1）显示分子中有-NH-基团，1655cm^-1有较强吸收，表明分子中含有羰基。
    ¹HNMR(acetone-d₆/TMS，ppm) δ_H7.27（1H，s），6.89（1H，可交换），11.79（1H，可交换），表明分子中含有1个烯质子，1个连N的质子和1个羧酸质子。通过¹³CNMR DEPT谱125.1(s)， 100 .3(s), 118.0(d), 107.0(s), 160.0(s)可推知1分子中含有2个双键，1个与双键共轭的羧酸。又因1 ¹HNMR中烯质子δ_H7.27为单峰，而且-NH质子在较高强δ_H 6.89，说明羧基远离-NH，综合上述考虑推导出1的结构式。
2.2 2的化学结构
    从100%乙酸乙酯洗脱出一黄色固体，甲醇5次重结晶，得黄色针状晶体2，熔点为220～225⁰C（分解）。EIMS显示分子离子峰为M⁺245，结合元素分析（理论值）C：52.95%(53.88%), H: 4.23%(4.49%), N:27.62%(28.5%)推导出2的分子式为C₁₁H₁₁N₅O₂。
    ¹³CNMR DEPT（DMSO/TMS）谱显示出2个CH₂（δ_C30.8, t; 40.2t）,2个CH（δ_C111.1, t; 122.9t），7个季C（δ_C122.7, S; 126.4, S; 126.2, S; 126.6, S; 159.8, S; 163.9,S; 171.4, S）其中2个羰基C（159.8, S; 171.4, S）。比较2与aldisin的¹HNMR和¹³CNMR谱数据^[3]，2分子中有如下形式片段（a）：

（a）		（b）

    重水交换实验显示有5个可交换的H，除掉上述分子片段2个活泼H外，还3个活泼H, δ_H 8.91，说明这3个H连在氮上。因为分子中存在共轭羰基，可推断分子中有片段 =C-C=O，除上述分子片段外还剩下1个C(δc,163.9)。3个活泼H，3个N，1个C，刚好与胍基片段接近，因此，推断分子中有片段（b）。将上述分子片段连接起来可得2的结构式。
3 参考文献
[1] Wright Anny e. Etal A new Bis(indole) Alkaloid from a Deep-water Marine Sponge of the Genus Spongosorites , J. Org. Chem. 1992, 57, 4772
[2] Che,George W. et al New Leukotrien B₄ Receptor Antagonist Leucettamine A And Related Imidazole Alkaloids from the Marine Spongia Leucetta Microraphis J. Nat. Prod. 1993, 56, 116
[3] Gurdial M. Sharma Characterization of A Yellow Compound Isolated from the Marine Sponge Phakellia Flabellata J. C. S. Chem. Comm. 1980, 435-436

徐石海 男，31岁，博士，国家自然科学基金(29372088)资助项目
98-11-24收稿，99-03-01修回